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冬油菜根质外体抗冻蛋白提取方法
2016-10-17 14:52   审核人:

申请号:201310313597.0 申请日:2013-07-24

申请人: 甘肃农业大学
地址: 730070 甘肃省兰州市安宁区营门村1号
发明(设计)人: 孙万仓 杨刚 史鹏辉 王丽萍 刘自刚 曾秀存 方彦 武军艳 杨宁宁 孔德晶 鲁美宏 赵艳宁 董红业 王月
主分类号: C07K14/415(2006.01)I
分类号: C07K14/415(2006.01)I C07K1/30(2006.01)I C07K1/14(2006.01)I
 
主权项  一种冬油菜根质外体抗冻蛋白的提取方法,其特征是包括有以下步骤:(1)采样:在10至12月或至第二年1月份,在田间挖出油菜根,在3‑5分钟内放入冰盒,带回实验室,保存于3‑5℃冰箱;(2)提取缓冲液1000ml按下列重量体积配制:0.05M/L Tris‑Hcl                                      6.057g调ph到8.0;0.01M/L EDTA‑Na2.2H2O(乙二胺四乙酸二钠)             3.72g;0.02M/LVC(维生素c)                                  3.52g;用ddH2O定容至1000ml,配好的缓冲液在3‑5℃环境中保存;(3)切条:清除油菜根部携带的土壤、去除根部干死部分,流水冲洗10‑12min,杂物洗净为止,用ddH2O冲洗2遍,用滤纸吸干表面水分后,将根清洗后剖开切成1‑2cm长条;(4)浸洗:用上述缓冲液浸洗切成条的根;(5)抽真空:将切成条的油菜根放入带塞的容器中,加入80‑100ml上述缓冲液,抽真空,稳定到0.07‑0.08Mpa后,继续抽真空7‑10min;(6)离心:倒掉缓冲液,用滤纸吸去根表面溶液后,将其放入注射器内,将注射器放入50ml离心管,在转速为6100‑6200rpm,3‑5℃,离心14‑16min,收集离心管底部液体,即为非质体提取物。
公开号  103333234A
公开日  2013-10-02
专利代理机构  兰州振华专利代理有限责任公司 62102
代理人  张真
颁证日  
优先权  
国际申请  
国际公布  
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